产品名称：基孔肯雅热病毒IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫吸附法）至慧策略
英文名称：CHIKV IgG ELISA Kit
用途：用于定性或半定量检测人血清或血浆中的抗基孔肯雅热病毒IgG抗体。
规格：96T至慧策略
一、【前言与简介】
基孔肯雅热是一种由伊蚊传播的病毒性传染病，其临床症状与登革热等疾病相似，常给临床诊断带来困难。抗基孔肯雅热病毒IgG抗体在感染中后期出现，并可长期存在于血液中，表明既往感染。本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA），利用纯化的基孔肯雅病毒抗原预包被微孔板，用于特异性检测人血清或血浆样本中的CHIKV IgG抗体。本产品适用于基孔肯雅热感染的辅助诊断、血清流行病学调查和免疫力评估。
二、【检测原理】至慧策略
本试剂盒采用间接ELISA原理。
将纯化的基孔肯雅病毒抗原包被于微孔板孔内。 将稀释后的样本加入微孔中，如果样本中存在抗CHIKV IgG抗体，则会与孔内的抗原特异性结合。 洗板去除未结合的成分。 加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的鼠抗人IgG抗体（酶标二抗），该抗体会与结合在抗原上的CHIKV IgG抗体结合，形成“抗原-抗体-酶标二抗”复合物。 再次洗板去除未结合的酶标二抗。 加入底物TMB（四甲基联苯胺）进行显色反应。孔中结合的酶催化无色TMB转化为蓝色产物。 加入终止液终止反应，颜色由蓝色变为黄色。 用酶标仪在450nm波长（参考波长630nm）下测定各孔的吸光度（OD值）。OD值与样本中CHIKV IgG抗体的含量成正比。展开剩余67%三、【试剂盒组成】
组分规格数量预包被抗原微孔板12孔×8条1板CHIKV IgG阳性对照1.0mL1管CHIKV IgG阴性对照1.0mL1管样本稀释液30mL1瓶酶标试剂（HRP-抗人IgG）12mL1瓶浓缩洗涤液 (20×)30mL1瓶TMB底物溶液12mL1瓶终止液12mL1瓶封板膜4张说明书1份
四、【储存条件及有效期】
未开封试剂盒：保存于2-8°C，有效期12个月。 已开封微孔板：应将剩余板条放入带有干燥剂的密封袋中，于2-8°C保存。 其他液体组分：使用后请及时盖紧瓶盖，于2-8°C保存。 浓缩洗涤液：如有结晶，请于37°C水浴至完全溶解后再进行稀释。 禁止冷冻！五、【样本要求】
样本类型：人血清或血浆（EDTA、肝素钠或枸橼酸钠抗凝）。 样本处理：样本应清澈透明，无沉淀或悬浮物。避免反复冻融，高脂血、溶血或污染的样本可能影响实验结果。 样本稀释：使用前需用样本稀释液按说明书要求进行预稀释（常见稀释比例为1:100）。六、【操作步骤】
准备工作：将所有试剂和样本恢复至室温（20-25°C），并轻轻摇匀。按需配制好工作浓度洗涤液（将20×浓缩洗涤液按1:19用蒸馏水稀释）。 设孔：设置空白孔1孔（只加样本稀释液）、阴性对照2孔、阳性对照2孔、样本孔若干。 加样：分别在相应孔中加入100μL已稀释的阴性对照、阳性对照和待测样本。空白孔加100μL样本稀释液。盖上封板膜，37°C孵育30分钟。 洗涤：弃去孔内液体，每孔加满工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，最后一次在吸水纸上拍干。 加酶：除空白孔外，每孔加入100μL酶标试剂。盖上封板膜，37°C孵育30分钟。 洗涤：重复步骤4的洗涤过程。 显色：每孔（包括空白孔）加入100μL TMB底物溶液，37°C避光显色15分钟。 终止：每孔加入50μL终止液，轻轻混匀，此时蓝色立即变为黄色。 检测：在加入终止液后15分钟内，用酶标仪在450nm波长下测量各孔的OD值（建议使用630nm作为参考波长进行双波长校正）。七、【结果判断】
有效性判断： 阴性对照平均OD值应 < 0.15。 阳性对照平均OD值应 ≥ 0.8。 空白孔OD值应 < 0.08。 以上条件需同时满足，否则实验无效，需重做。 临界值（Cut-off）计算： Cut-off值 = 阴性对照平均OD值 + 0.15 （注：此计算公式为常见示例，具体请以实际试剂盒说明书为准） 结果解释： 阴性 (Negative)：样本OD值 < Cut-off值。表明样本中未检测到CHIKV IgG抗体。 阳性 (Positive)：样本OD值 ≥ Cut-off值。表明样本中存在CHIKV IgG抗体，提示既往感染或已产生免疫应答。八、【注意事项】至慧策略
本试剂盒仅用于体外诊断。 操作时必须穿戴实验服、手套，严格遵守生物安全规范，所有样本和试剂均应视为有潜在传染性物质进行处理。 不同批次的试剂组分不得混用，请在有效期内使用。 加样时请准确计时，确保所有孔的反应时间一致。 显色反应对光敏感，需避光进行。 实验结果应结合患者临床症状、接触史及其他实验室检查结果由专业医生进行综合判断。发布于：广东省广瑞网提示：文章来自网络，不代表本站观点。
